小鼠小胶质BV2使用小tips来了，请注意查收

　　小鼠小胶质BV2是从小鼠脑小胶质瘤中收集的，干冰运输并转移到液氮或-80度冰箱冷冻或收到后立即直接回收；存活的细胞在接收后应继续生长，当传代达到良好的细胞生长状态时再进行冷冻。收到后，请检查是否有漏液。先在显微镜下确认细胞生长状态，用酒精对瓶壁进行消毒，将T25瓶在37℃培养2-3H左右。
 

　　离心后，除去上清液，加入6ml新的*培养基，重新加入原T25培养瓶。如果细胞长到90%，请及时进行细胞传代，传代应使用完整培养基。半贴壁细胞会黏附在瓶底，但黏附不紧密。轻轻吸取培养基，轻轻吹打细胞表面，细胞表面不经胰蛋白酶消化即脱落。推荐使用培养皿进行培养，更适合吹细胞。
 

　　吹细胞时尽量轻柔，不要产生过多气泡，以免影响细胞状态。下面是小鼠小胶质BV2使用小tips，希望对你的使用会有所帮助。
 

　　1、小鼠小胶质BV2呈半贴壁圆形或多角形，有的呈圆形悬浮状。它们可以在传代过程中收集和培养。更换溶液时，将悬浮的细胞离心收集，然后重新连接到原瓶中。如果贴壁细胞多，活性好，可以不用悬浮细胞；

　　2、细胞对胰蛋白酶敏感。胰蛋白酶消化后，细胞形状会更加纺锤形并变得紧密，不建议通过胰蛋白酶消化；

　　3、细胞生长快，培养基消耗快。在培养过程中密切注意细胞状态。当密度高，培养液趋于变黄时，及时更换溶液，避免细胞状态变差；

　　4、小鼠小胶质BV2细胞冷冻后，取出上清，用PBS洗涤，然后加入1ml胰蛋白酶。待细胞变圆脱落后，加入1ml培养基终止消化，用血细胞计数板计数；

　　5、4min1000rpm离心去除上清液。加入1ml血清重悬细胞，根据细胞数加入血清和DMSO，轻轻混匀。DMSO终浓度为10%，细胞密度为1-2xe6/ml。每个冷冻保存管用1ml细胞悬液冷冻，注意冻存管的鉴别；

　　6、将冻存管放入程序冷却箱内，放入-80℃冰箱，至少2小时后转入液氮冲洗保存。记录低温恒温器的位置以备下次检索。