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说说小鼠小胶质BV2的传代方法和冻存方法

更新时间:2023-06-16 浏览次数:2667

  小鼠小胶质BV2是一个不断增长和分化的细胞群。由于其遗传转化,它具有无限的生长潜力。体外培养的细胞系用于医学或科学研究。事实上,连续细胞系可以在大量培养基中培养。随着代数的增加,细胞的基因型和表型可能会发生变化。保证细胞纯度在90%以上,并通过微生物检测,确保不含HIV、HBV、HCV、支原体、真菌等各类细菌。
  如果悬浮物来自血液、羊水、胸水或腹水,简单的方法是用1000r/min低速离心10分钟。如果悬浮液体积较大,可适当延长离心时间,但速度不宜过高,延迟不宜过长,以免挤压或对细胞造成机械损伤。离心沉淀后,用无钙无镁PBS洗2次,培养基洗1次,调整合适的细胞浓度后,装瓶培养。如果选择悬浮液中的一些细胞,通常使用离心后的细胞分层液,因为由于各种细胞的比重不同,在离心后的分层液中可以形成不同的层,从而可以收获靶细胞作为需要。
  
  一、小鼠小胶质BV2传代方法:
  1、轻轻吸去培养上清液,留下2-3ml培养基,轻轻吹打细胞表面,吹掉细胞;
  2、混匀细胞,收集细胞培养基,900rpm离心3-5分钟,弃上清;
  3、加入新的培养基,轻轻重悬细胞,均匀分布到新的培养瓶中;
  4、补充完整培养基,将培养瓶放回培养箱进行静态培养。
 
  二、小鼠小胶质BV2冻存方法:
  1、离心得到细胞沉淀后,加入配置好的冻存液,轻轻重悬细胞;
  2、尽快将细胞悬液转移到标记好的冻存管中;
  3、将冻存管转移到程序冻存箱中,放入-80℃冰箱过夜,次日转移到液氮中保存;如果没有冻存实验室,可以在加入细胞后5-10分钟将细胞置于4度的泡沫箱中。然后-20在2h保存,然后转移到-80度过夜。第二天转移到液氮中保存。

小鼠小胶质BV2

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