说说小鼠小胶质BV2的传代方法和冻存方法

　　小鼠小胶质BV2是一个不断增长和分化的细胞群。由于其遗传转化，它具有无限的生长潜力。体外培养的细胞系用于医学或科学研究。事实上，连续细胞系可以在大量培养基中培养。随着代数的增加，细胞的基因型和表型可能会发生变化。保证细胞纯度在90%以上，并通过微生物检测，确保不含HIV、HBV、HCV、支原体、真菌等各类细菌。

　　如果悬浮物来自血液、羊水、胸水或腹水，简单的方法是用1000r/min低速离心10分钟。如果悬浮液体积较大，可适当延长离心时间，但速度不宜过高，延迟不宜过长，以免挤压或对细胞造成机械损伤。离心沉淀后，用无钙无镁PBS洗2次，培养基洗1次，调整合适的细胞浓度后，装瓶培养。如果选择悬浮液中的一些细胞，通常使用离心后的细胞分层液，因为由于各种细胞的比重不同，在离心后的分层液中可以形成不同的层，从而可以收获靶细胞作为需要。

　　

　　一、小鼠小胶质BV2传代方法：

　　1、轻轻吸去培养上清液，留下2-3ml培养基，轻轻吹打细胞表面，吹掉细胞；

　　2、混匀细胞，收集细胞培养基，900rpm离心3-5分钟，弃上清；

　　3、加入新的培养基，轻轻重悬细胞，均匀分布到新的培养瓶中；

　　4、补充完整培养基，将培养瓶放回培养箱进行静态培养。

 

　　二、小鼠小胶质BV2冻存方法：

　　1、离心得到细胞沉淀后，加入配置好的冻存液，轻轻重悬细胞；

　　2、尽快将细胞悬液转移到标记好的冻存管中；

　　3、将冻存管转移到程序冻存箱中，放入-80℃冰箱过夜，次日转移到液氮中保存；如果没有冻存实验室，可以在加入细胞后5-10分钟将细胞置于4度的泡沫箱中。然后-20在2h保存，然后转移到-80度过夜。第二天转移到液氮中保存。