RAMOS 人B淋巴细胞瘤细胞/STR鉴定

RAMOS 人B淋巴细胞瘤细胞/STR鉴定介绍

该细胞来源于一位3岁的白人Burkitt淋巴瘤患者；EBV阴性；表达IL-4受体和低亲和性IgE受体（CD23）；分泌IgM（lamda L）；表达膜型和分泌型的免疫球蛋白。

细胞特性

1） 来源：血液

2） 形态：淋巴母细胞样，悬浮生长

3） 含量：>1x106 个/mL

4） 污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性

5） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装

运输和保存

可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式：

（1）干冰运输，收到后立即转入液氮或者-80度冰箱冻存或直接复苏；

（2）存活细胞，收到后应继续生长，传代达到细胞生长状态良好时，再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。

（3）收到细胞后请拍照，3天内如果发现污染，请及时拍照与我们联系。

细胞用途：仅供科研使用。

细胞接收后的处理：

1） 收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。

2） 请先在显微镜下确认细胞生长状态，酒精消毒瓶壁并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。

3） 将T25瓶中的细胞培养基离心后，去上清，添加6ml*培养基，加入新的T25瓶中继续培养。

4） 如果细胞长满80%请及时进行细胞传代.

5） 接到细胞次日，请检查细胞是否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。

RAMOS 人B淋巴细胞瘤细胞/STR鉴定培养步骤

一．培养基及培养冻存条件准备：

1） 准备RPMI-1640培养基；优质胎牛血清（热灭活），10%；双抗，1%。

2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。

3） 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。

二． 细胞处理：

1） 复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，离心管加入4mL培养基混合均匀。在800-9239653RPM条件下离心4-5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入T25培养瓶中培养，补加培养基至6ml。

2） 细胞传代：如果细胞密度达80%，即可进行传代培养。

注：di一次传代推荐传代比例为1:2，以后传代比例可根据客户需要自己决定。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。

下面T25瓶为类；

1，细胞冻存时，取上清，可使用血球计数板计数。

2，4min ，1000rpm 离心去掉上清。加1ml血清重悬细胞，根据细胞数量加入血清和DMSO，轻轻混匀，DMSO终浓度为10%，细胞密度1-2xE6/ml，每支冻存管冻存1ml细胞悬液，注意冻存管做好标识。

3，将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少10个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

镜像绮点（上海）细胞技术有限公司主要产品和技术服务：

一、原代细胞服务
       各类模式哺乳动物的多种原代细胞资源；
       多种人源性正常及肿瘤原代细胞资源；
       原代细胞分离和培养相关试剂、kit、培养基添加剂等；
       原代细胞相关技术服务和整体实验外包服务；

二、细胞株/系服务
       细胞株/系培养、增殖、冻存和相关说明书；
       细胞系培养过程的技术指导；
       细胞系培养基、添加剂、血清及相关生长因子、试剂等；

三、iPS细胞
       iPS细胞基础培养（有滋养层or无滋养层在）；
       iPS细胞增殖及冷冻保存；
       iPS基础培养技术实习；
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四、技术外包服务：各类细胞生物学实验、分子生物学实验、显微镜拍照服务等

五、其他：根据客户需要定制服务等

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