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产品名称:

MOLT-4 人急性淋巴母细胞性白血病细胞

产品型号: MOLT-4细胞
产品时间: 2024-08-21
描述:MOLT-4 人急性淋巴母细胞性白血病细胞
细胞介绍
该细胞株从一位复发病人的细胞中建立。该病人接受过多种药物联合前期化liao。p53基因的248位密码子有一个G-A突变。P53不表达,不生成免疫球蛋白或EB病毒。

产品介绍

MOLT-4 人急性淋巴母细胞性白血病细胞

细胞介绍

该细胞株从一位复发病人的细胞中建立。该病人接受过多种药物联合前期化liao。p53基因的248位密码子有一个G-A突变。P53不表达,不生成免疫球蛋白或EB病毒。

细胞特性

1) 来源:T 淋巴母细胞

2) 形态:淋巴母细胞样,悬浮生长

3) 含量:>1x10^6 细胞数

4) 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装

5)  用途:仅供科研使用。

运输和保存

干冰运输及复苏好存活细胞

(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。

(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。

细胞接收后的处理

1) 收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。

2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。

3) 悬浮细胞:T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中(加入按照说明书细胞培养条件新配制的wan全培养基)。

4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的wan全培养基来培养细胞。  收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代 。   

MOLT-4 人急性淋巴母细胞性白血病细胞

一.培养基及培养冻存条件准备:

1) 准备RPMI-1640(含NaHCO3  1.5g/L推荐iCell-128-0002 或者GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L,或者ATCC-formulated RPMI-1640 Medium, Catalog No. 30-2001  ATCC 改良)培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。

注意:该细胞在1640(含1.5g/LNaHCO3)培养基中生长良好,大部分品牌的1640含有较高浓度的NaHCO3(3.7g/L),若使用1640(3.7g/L NaHCO3)培养基培养细胞时需要提高CO2浓度(7%-10%)。

2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。

3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。

二. 细胞处理:

1) 冻存细胞的复苏:

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mLwan全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,wan全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8mlwan全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。

2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:

悬浮状态下生长的细胞,可以通过向培养瓶中添加wan全培养基来维持细胞的生长状态,一般情况下细胞密度维持在1×105~1×10^76个/mL(不同细胞对密度要求不同,)可以维持细胞的正常生长。如需分瓶可以将细胞悬液收集到离心管中1000rpm,离心5min,弃去上清,补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的wan全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。

3) 细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。

下面T25瓶为例;

1. 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10^6~1×616个活细胞/ml.

2. 1000rpm离心3-5min,去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ,按每1ml冻存液含1×10^6~1×616个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。

3.将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80度冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。

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