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人T淋巴细胞白血病细胞Jurkat(clone E6-1)介绍
这是Jurkat-FHCRC细胞株(Jurkat细胞株的衍生)的一个克隆。 Jurkat细胞株来源于一个14岁男孩的外周血。 经佛波酯和外源凝集素或抗T3单克隆抗体(两种类型的诱导都需要)诱导后可产生大量IL-2。
人T淋巴细胞白血病细胞Jurkat(clone E6-1)特性
1) 来源:T淋巴细胞;急性T细胞白血病
2) 形态:淋巴母细胞,悬浮生长
3) 含量:>1x106 个/mL
4) 污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5) 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装
运输和保存
可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式
(1)干冰运输,收到后立即转入液氮或者-80度冰箱冻存或直接复苏;
(2)存活细胞,收到后应继续生长,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。
(3)收到细胞后请拍照,3天内如果发现污染,请及时拍照与我们联系。
细胞用途:仅供科研使用。
Jurkat 人T淋巴细胞白血病细胞/STR鉴定接收后的处理:
1) 收到细胞后,请检查发货培养瓶的状况,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2) 在显微镜下确认细胞生长状态时,在低倍镜(4或5X物镜)下进行,能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X和20×物镜下,同时给刚收到的细胞拍照,(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为细胞需要售后时提供收到细胞时细胞状态的依据。
3) 观察好细胞状态后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h。
4) 贴壁细胞:在运输过程中贴壁细胞会有脱落的现象,如发现贴壁细胞有脱落或者脱落后抱团生长,可将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和未贴壁细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到加有按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基的原培养瓶中(或新的培养瓶中)。
5) 悬浮细胞:T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中(加入按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基)。
6)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞。 收到细胞后di一次传代建议1:2传代 。
培养步骤
一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备RPMI-1640(推荐:iCell-0002)培养基;优质胎牛血清,10%; GlutaMAX (Gibco,35050061),1%;双抗,1%。
参考传代周期:不超过300万细胞/ mL,建议将活细胞密度控制在10万-100万/ mL之间
参考传代密度:10万活细胞/ mL,参考换液频率:2-3天。
2) 注意
a)该细胞为悬浮细胞,根据培养经验以及客户的反馈,传代时使用【半换液法】对细胞状态有利,因此我库建议您使用【半换液法】进行传代。同时,您在收到细胞后,请不要通过离心的方式收集细胞,可以直接向培养瓶中添加等体积的新鲜培养液,然后将细胞吹打均匀后移入两个新的T25培养瓶中继续培养即可。
b)改细胞对血清质量较为敏感,我库建议您使用进口*优质血清进行培养。
c)该细胞对细胞密度较为敏感,培养,传代时请注意保持细胞密度在合适的范围。
3) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
4) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
二. 细胞处理:
1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入250px皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)补加到6ml。第二天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
1. 收到细胞后*传代推荐将细胞悬液按1:2的比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中,建议冻存一支备用,后续传代根据实际情况按1:2到1:5的比例进行。换液可通过添加几毫升新鲜培养基或离心之后去上清液,添加新培养基重悬培养。
2) 细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。
下面T25瓶为类;
1,细胞冻存时,取上清,可使用血球计数板计数。
2,4min ,1000rpm 离心去掉上清。加1ml血清重悬细胞,根据细胞数量加入血清和DMSO,轻轻混匀,DMSO终浓度为10%,细胞密度1-2xE6/ml,每支冻存管冻存1ml细胞悬液,注意冻存管做好标识。
3,将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少064个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
镜像绮点(上海)细胞技术有限公司主要产品和技术服务:
一、原代细胞服务
各类模式哺乳动物的多种原代细胞资源;
多种人源性正常及肿瘤原代细胞资源;
原代细胞分离和培养相关试剂、kit、培养基添加剂等;
原代细胞相关技术服务和整体实验外包服务;
二、细胞株/系服务
细胞株/系培养、增殖、冻存和相关说明书;
细胞系培养过程的技术指导;
细胞系培养基、添加剂、血清及相关生长因子、试剂等;
三、iPS细胞
iPS细胞基础培养(有滋养层or无滋养层在);
iPS细胞增殖及冷冻保存;
iPS基础培养技术实习;
新药及实验仪器上市前评估;
四、技术外包服务:各类细胞生物学实验、分子生物学实验、显微镜拍照服务等
五、其他:根据客户需要定制服务等
序号 | 产品名称 | 货号 | 规格 | 售价 | 备注 |
1 | 培养基1640 | icell-0002 | 500ml | 140 |
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2 | 培养基DMEM | icell-0001 | 500ml | 140 |
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3 | 培养基DMEM/F12 | icell-0005 | 500ml | 140 |
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4 | 内皮细胞培养基ECMsciencel | icell-0016 | 500ml | 2280 |
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5 | 动物上皮细胞培养基Epicm-a | icell-0015 | 500ml | 1980 |
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6 | 上皮细胞培养基Epicm | icell-0017 | 500ml | 1980 |
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7 | Mccoy’s 5A 培养基 | icell-0011 | 500ml | 160 |
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8 | MEM培养基 | icell-0012 | 500ml | 140 |
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9 | FBS北美胎牛血清 | GIBCO 16000-044 | 500ml | 6800 |
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10 | FBS墨西哥胎牛血清 | 10437-028 | 500ml | 5616 |
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11 | 马血清 | gibco.16050122 | 500ml | 1489 |
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12 | DMSO | sigma-D2650 | 100ml | 1520 |
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13 | PBS片剂(1000ml) | 09-9400-100 | 100片 | 4170 |
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14 | PS双抗(进口) | 15140-122 | 100ml | 452 |
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15 | yi蛋白酶 | 25200-072 | 500ml | 665 |
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