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产品名称:

CCC-HPF-1 人胚肺成纤维细胞

产品型号: CCC-HPF-1细胞
产品时间: 2024-08-21
描述:CCC-HPF-1 人胚肺成纤维细胞特性
1) 来源:肺
2) 形态:上皮细胞样,贴壁生长
3) 含量:1x10^6 个/mL
4) 污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5) 规格:T75瓶或者1mL冻存管包装
6) 准备RPMI-1640培养基,90%;优质胎牛血清,10%.

产品介绍

CCC-HPF-1 人胚肺成纤维细胞特性

1) 来源:肺
2) 形态:上皮细胞样,贴壁生长
3) 含量:>1x106 个/mL
4) 污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5) 规格:T75瓶或者1mL冻存管包装

运输和保存

可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式

(1)干冰运输,收到后立即转入液氮或者-80度冰箱冻存或直接复苏;

(2)存活细胞,收到后应继续生长,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。

(3)收到细胞后请拍照,3天内如果发现污染,请及时拍照与我们联系。

CCC-HPF-1 人胚肺成纤维细胞用途:仅供科研使用。

接收后的处理:
1) 收到细胞后,请检查发货培养瓶的状况,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2) 在显微镜下确认细胞生长状态时,在低倍镜(4或5X物镜)下进行,能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X和20×物镜下,同时给刚收到的细胞拍照,(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为细胞需要售后时提供收到细胞时细胞状态的依据。
3) 观察好细胞状态后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h。
4) 贴壁细胞:在运输过程中贴壁细胞会有脱落的现象,如发现贴壁细胞有脱落或者脱落后抱团生长,可将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和未贴壁细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到加有按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基的原培养瓶中(或新的培养瓶中)。
5) 悬浮细胞:T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中(加入按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基)。
6)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞。  收到细胞后di一次传代建议1:2传代 。

                     
细胞
培养步骤
一.培养基及培养冻存条件准备:

1) 准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二. 细胞处理:
1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入250px皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量*培养基终止消化。
3. 轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中。

3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。

下面T25瓶为类;

1,细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗一遍后加入1mlyi酶,细胞变圆脱落后,加入1ml*培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2,4min 1000rpm 离心去掉上清。加1ml血清重悬细胞,根据细胞数量加入血清和DMSO,轻轻混匀,DMSO终浓度为10%,细胞密度1-2xE6/ml,每支冻存管冻存1ml细胞悬液,注意冻存管做好标识。
3,将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少38个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

镜像绮点(上海)细胞技术有限公司主要产品和技术服务:

一、原代细胞服务
      各类模式哺乳动物的多种原代细胞资源;
      多种人源性正常及肿瘤原代细胞资源;
      原代细胞分离和培养相关试剂、kit、培养基添加剂等;
      原代细胞相关技术服务和整体实验外包服务;

二、细胞株/系服务
      细胞株/系培养、增殖、冻存和相关说明书;
      细胞系培养过程的技术指导;
      细胞系培养基、添加剂、血清及相关生长因子、试剂等;

三、iPS细胞
      iPS细胞基础培养(有滋养层or无滋养层在);
      iPS细胞增殖及冷冻保存;
      iPS基础培养技术实习;
      新药及实验仪器上市前评估;

四、技术外包服务:各类细胞生物学实验、分子生物学实验、显微镜拍照服务等

五、其他:根据客户需要定制服务等

序号

产品名称

货号

规格

售价

备注

1

培养基1640

icell-0002

500ml

140

2

培养基DMEM

icell-0001

500ml

140

3

培养基DMEM/F12

icell-0005

500ml

140

4

内皮细胞培养基ECMsciencel

icell-0016

500ml

2280

5

动物上皮细胞培养基Epicm-a

icell-0015

500ml

1980

6

上皮细胞培养基Epicm

icell-0017

500ml

1980

7

Mccoy’s 5A 培养基

icell-0011

500ml

160

8

MEM培养基

icell-0012

500ml

140

9

FBS北美胎牛血清

GIBCO   16000-044

500ml

6800

10

FBS墨西哥胎牛血清

10437-028

500ml

5616

11

马血清

gibco.16050122

500ml

1489

12

DMSO

sigma-D2650

100ml

1520

13

PBS片剂(1000ml)

09-9400-100

100片

4170

14

PS双抗(进口)

15140-122

100ml

452

15

yi蛋白酶

25200-072

500ml

665



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