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NR8383 大鼠肺泡巨噬细胞/镜像绮点(iCell)

产品型号: NR8383
产品时间: 2024-09-24
描述:NR8383 大鼠肺泡巨噬细胞/镜像绮点(iCell)
NR8383 大鼠肺泡巨噬细胞介绍
NR8383 (正常大鼠,1983年)来源于肺灌洗时的正常大鼠肺泡巨噬细胞。细胞在gerbil肺细胞连续培养液存在下培养了大约8-25个月。随后,不再需要外源生长因子。通过有限稀释法从单个细胞克隆并亚克隆NR8383细胞,并三次用软琼脂亚克隆

产品介绍

NR8383 大鼠肺泡巨噬细胞/镜像绮点(iCell)介绍

NR8383 (正常大鼠,1983年)来源于肺灌洗时的正常大鼠肺泡巨噬细胞。细胞在gerbil肺细胞连续培养液存在下培养了大约8-25个月。随后,不再需要外源生长因子。通过有限稀释法从单个细胞克隆并亚克隆NR8383细胞,并三次用软琼脂亚克隆。细胞表现出巨噬细胞的特性,吞噬酵母多糖和铜绿,非特异性脂酶活性,Fc受体,氧化降解;分泌IL-1, TGF-β和IL-6,可重复地响应外源生长因子。NR8383细胞响应博莱霉素,分泌TGF-β前体。在博莱霉素刺激下,TGF –β mRNA表达也上升。细胞对内毒素敏感。1-10 钠克/毫升的LPS水平抑制增生达50%。 即使达到0.001毫克/毫升的水平,LPS抑制还是无毒且在后续过程中可逆的。NR8383细胞株提供了高响应的肺泡巨噬细胞的均一来源,可以用于体外研究巨响细胞相关活性。

 

NR8383 大鼠肺泡巨噬细胞/镜像绮点(iCell)特性

1) 来源:肺;巨噬细胞 

2) 形态:巨噬细胞,半悬浮生长

3) 含量:>1x106 个/mL

4) 污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性

5) 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装

 

运输和保存

可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式:

(1)干冰运输,收到后立即转入液氮或者-80度冰箱冻存或直接复苏;

(2)存活细胞,收到后应继续生长,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。

(3)收到细胞后请拍照,3天内如果发现污染,请及时拍照与我们联系。

 

 

细胞接收后的处理:

1) 收到细胞后,请检查是否漏液,如果漏液,请拍照片发给我们。

2) 请先在显微镜下确认细胞生长状态,酒精消毒瓶壁并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。

3) T25瓶中的培养基取出离心后,去上清,添加6ml新的*培养基,重新加入原T25培养瓶。

4) 如果细胞长满80-90%请及时进行细胞传代,传代培养用本公司附带的*培养基。

5) 接到细胞次日,请检查细胞是否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。

 

细胞用途:仅供科研使用。

                       

细胞培养操作规程,供参考

一.培养基及培养冻存条件准备:

1) 准备F-12K培养基;优质胎牛血清(热灭活),15%;L-谷氨酰胺,2mM;双抗,1%。

2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。

3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。

二. 细胞处理:

1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,离心管加入4mL培养基混合均匀。在800-9239653RPM条件下离心4-5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入T25培养瓶中培养,补加培养基至6ml。

2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

1. 将上清取出保留,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量*培养基终止消化。

3. 轻轻打匀后吸出,和上清一起在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,加1-2mL培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按1:2到1:5比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中。

3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。*次传代为1:2。

下面T25瓶为类;

1,细胞冻存时,取出上清,PBS清洗一遍后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入1ml*培养基终止消化,可使用血球计数板计数。

2,4min 1000rpm 离心去掉上清。加1ml血清重悬细胞,根据细胞数量加入血清和DMSO,轻轻混匀,DMSO终浓度为10%,细胞密度1-2xE6/ml,每支冻存管冻存1ml细胞悬液,注意冻存管做好标识。

3,将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少63个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

镜像绮点(上海)细胞技术有限公司主要产品和服务介绍:

        一、原代细胞服务:
               各类模式哺乳动物的多种原代细胞资源
               多种人源性正常及肿瘤原代细胞资源
               原代细胞分离和培养相关试剂、kit、培养基添加剂等
               原代细胞相关技术服务及整体实验外包服务

        二、细胞系服务:
               细胞株/系培养、增殖、冻存和相关说明书
               细胞系培养过程的技术指导
               细胞系培养基、添加剂、血清及相关生长因子、试剂等

        三、iPS细胞服务:
               iPS细胞基础培养(有滋养层or无滋养层)
               iPS细胞增殖及冷冻保存
               iPS基础培养技术实习
               新药及实验仪器上市前评估

        四、其他技术外包服务、客户定制服务等

镜像绮点(上海)细胞技术有限公司

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