产品分类
相关文章

您的位置:首页 > 产品中心 > 细胞分类 > 细胞系 > E14E14 小鼠胚胎干细胞/镜像绮点(iCell)

产品中心
产品名称:

E14 小鼠胚胎干细胞/镜像绮点(iCell)

产品型号: E14
产品时间: 2024-09-23
描述:E14 小鼠胚胎干细胞/镜像绮点(iCell)
E14 小鼠胚胎干细胞介绍
1) 来源:小鼠,胚胎内细胞团
2) 形态:球形克隆
3) 含量:>1x106 个/mL
4) 污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5) 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装
6)准备DMEM培养基;优质胎牛血清,15%

产品介绍

E14 小鼠胚胎干细胞/镜像绮点(iCell)特性

1) 来源:小鼠,胚胎内细胞团

2) 形态:球形克隆

3) 含量:>1x106 个/mL

4) 污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性

5) 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装

 

运输和保存

可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式

(1)干冰运输,收到后立即转入液氮冻存或直接复苏;

(2)存活细胞,收到后应继续生长,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。

(3)具体操作见细胞培养步骤。收到细胞后请拍照,3天内如果发现污染,请及时拍照与我们联系。

 

细胞接受后的处理:

1) 收到细胞后,请检查发货培养瓶的状况,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。

2) 在显微镜下确认细胞生长状态时,在低倍镜(4或5X物镜)下进行,能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X和20×物镜下,同时给细胞拍照各2-3张(10×,20×都要拍照),作为售后的依据。

3) 观察好细胞状态后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h。

4) 贴壁细胞:在运输过程中贴壁细胞会有脱落的现象,如发现贴壁细胞有脱落或者脱落后抱团生长,可将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和未贴壁细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到加有按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基的原培养瓶中(或新的培养瓶中)。

5) 悬浮细胞:T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中(加入按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基)。

6)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞。  收到细胞后*次传代建议1:2传代 。

细胞用途:仅供科研使用。

E14 小鼠胚胎干细胞/镜像绮点(iCell)培养操作规程,供参考

一.培养基及培养冻存条件准备

1) 准备DMEM(推荐iCell-0001)培养基;优质胎牛血清,15%;L-Glu,1%;NEAA,1%;丙酮酸钠,1%;添加1uL/mLβ-Mer和0.1uL/mLLIF;双抗,1%;培养瓶用0.1%明胶包被

2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。

3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。

二. 细胞处理:

1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:

1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3ml此细胞的培养基终止消化。

3. 轻轻吹打后吸出,移入15ml离心管中,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养液后吹匀。

4. 收到细胞后*传代推荐将细胞悬液按1:2的比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中,建议冻存一支备用,后续传代根据实际情况按1:2到1:5的比例进行。

3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。

下面T25瓶为类;

1,细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗一遍后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入1ml*培养基终止消化,可使用血球计数板计数。

2,4min 1000rpm 离心去掉上清。加1ml血清重悬细胞,根据细胞数量加入血清和DMSO,轻轻混匀,DMSO终浓度为10%,细胞密度1-2xE6/ml,每支冻存管冻存1ml细胞悬液,注意冻存管做好标识。

3,将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少8581个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

镜像绮点(上海)细胞技术有限公司主要产品和服务介绍:

        一、原代细胞服务:
               各类模式哺乳动物的多种原代细胞资源
               多种人源性正常及肿瘤原代细胞资源
               原代细胞分离和培养相关试剂、kit、培养基添加剂等
               原代细胞相关技术服务及整体实验外包服务

        二、细胞系服务:
               细胞株/系培养、增殖、冻存和相关说明书
               细胞系培养过程的技术指导
               细胞系培养基、添加剂、血清及相关生长因子、试剂等

        三、iPS细胞服务:
               iPS细胞基础培养(有滋养层or无滋养层)
               iPS细胞增殖及冷冻保存
               iPS基础培养技术实习
               新药及实验仪器上市前评估

        四、其他技术外包服务、客户定制服务等

镜像绮点(上海)细胞技术有限公司

相关产品

留言框

  • 产品:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 省份:

  • 详细地址:

  • 补充说明:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7

镜像绮点(上海)细胞技术有限公司地址:上海市奉贤区茂园路260号临港南桥科技城56号楼134层 邮箱:[email protected]

公司版权所有 © 2024   备案号:琼ICP备23965349号    技术支持:  GoogleSitemap

在线客服 联系方式 二维码

服务热线

400-9239653

扫一扫,关注我们