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产品介绍
人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y/STR鉴定介绍
SH-SY5Y是1970年建自骨瘤转移灶的神经母细胞瘤SK-N-SH细胞系经三次克隆后的亚系(SK-N-SH→SH-SY→SH-SY5→SH-SY5Y)。该细胞显示中等水平的多巴胺-β-羟基酶活性。SH-SY5Y细胞的饱和密度大于1X106细胞/cm2。
人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y/STR鉴定特性
(1）来源：脑神经母细胞瘤，转移部位骨髓
(2）形态：上皮细胞样，半贴壁生长
(3）含量：>1x46个/mL
(4）污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
(5）规格：T25瓶或者1mL冻存管包装
运输和保存
可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式：
（1）干冰运输，收到后立即转入液氮或者-80度冰箱冻存或直接复苏；
（2）存活细胞，收到后应继续生长，传代达到细胞生长状态良好时，再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。
（3）收到细胞后请拍照，3天内如果发现污染，请及时拍照与我们联系。
SH-SY5Y人神经母细胞瘤细胞/STR鉴定/镜像绮点（iCell）用途：仅供科研使用。
细胞接收后的处理：
(1）收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
(2）请先在显微镜下确认细胞生长状态，酒精消毒瓶壁并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。
(3）T25瓶中的培养基取出离心后，去上清，添加6ml新的*培养基，重新加入原T25培养瓶。
(4）如果细胞长满90%请及时进行细胞传代，传代培养用本公司附带的*培养基。
(5）接到细胞次日，请检查细胞是否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。
细胞培养步骤
一．培养基及培养冻存条件准备：
(1）准备MEM/F-12（1：1）培养基；优质胎牛血清，10%；双抗，1%。
(2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
(3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。
二．细胞处理：
(1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，离心管加入4mL培养基混合均匀。在800-9239653RPM条件下离心4-5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入T25培养瓶中培养，补加培养基至6ml。
(2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1、将上清取出，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2、加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量*培养基终止消化。
3、轻轻打匀后吸出，和上清一起在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，加1-2mL培养液后吹匀。
4、将细胞悬液按1：2到1:5比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中。
注：次传代推荐传代比例为1:2，以后传代比例可根据客户需要自己决定。
(3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。
下面T25瓶为类；
1、细胞冻存时，取出上清，PBS清洗一遍后加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入1ml*培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2、4min1000rpm离心去掉上清。加1ml血清重悬细胞，根据细胞数量加入血清和DMSO，轻轻混匀，DMSO终浓度为10%，细胞密度1-2xE6/ml，每支冻存管冻存1ml细胞悬液，注意冻存管做好标识。
3、将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少322个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
镜像绮点（上海）细胞技术有限公司主要产品和服务介绍：
一、原代细胞服务：
各类模式哺乳动物的多种原代细胞资源
多种人源性正常及肿瘤原代细胞资源
原代细胞分离和培养相关试剂、kit、培养基添加剂等
原代细胞相关技术服务及整体实验外包服务
二、细胞系服务：
细胞株/系培养、增殖、冻存和相关说明书
细胞系培养过程的技术指导
细胞系培养基、添加剂、血清及相关生长因子、试剂等
三、iPS细胞服务：
iPS细胞基础培养（有滋养层or无滋养层）
iPS细胞增殖及冷冻保存
iPS基础培养技术实习
新药及实验仪器上市前评估
四、其他技术外包服务、客户定制服务等
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