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产品介绍
镜像绮点( 上海 )生物技术股份有限公司( iCell Bioscience Inc,Shanghai )是一家专注于研发生产高品质人体组织源及动物组织源原代细胞、细胞系、iPS细胞等产品，并提供专业技术服务外包的技术企业，公司总部位于上海。
细胞介绍
此细胞株源自肺粘膜上皮细胞癌的淋巴结转移灶。这个细胞系用化学合成培养基分离得到，并转换成含血清培养液培养。此细胞在培养时在亚显微结构上保留了粘膜上皮细胞的特性，并表现出鳞状分化的多种标记。
细胞特性
1） 来源：肺
2） 形态：上皮细胞样，贴壁生长
3） 含量：>1x106 个/mL
4） 污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装
运输和保存
可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式：
（1）干冰运输，收到后立即转入液氮或者-80度冰箱冻存或直接复苏；
（2）存活细胞，收到后应继续生长，传代达到细胞生长状态良好时，再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。
（3）收到细胞后请拍照，3天内如果发现污染，请及时拍照与我们联系。
细胞用途：仅供科研使用。
1） 收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2） 请先在显微镜下确认细胞生长状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。
3） 弃去T25瓶中的培养基，添加6ml新的*培养基。
4） 如果细胞长满（90%以上）请及时进行细胞传代。
5） 接到细胞次日，请检查细胞是否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。
细胞培养步骤
一．培养基及培养冻存条件准备：
1） 准备RPMI-1640培养基；优质胎牛血清，10%；双抗，1%。
2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3） 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。
二． 细胞处理：
1） 复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入250px皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
注：*次传代推荐传代比例为1:2，以后传代比例可根据客户需要自己决定。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。
下面T25瓶为类；
1，细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗一遍后加入1mlyi酶，细胞变圆脱落后，加入1ml含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2，4min 1000rpm 离心去掉上清。加1ml血清重悬细胞，根据细胞数量加入血清和DMSO，轻轻混匀，DMSO终浓度为10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存1ml细胞悬液，注意冻存管做好标识。
3，将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少69个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
镜像绮点（上海）细胞技术有限公司主要产品和技术服务：
一、原代细胞服务
各类模式哺乳动物的多种原代细胞资源；
多种人源性正常及肿瘤原代细胞资源；
原代细胞分离和培养相关试剂、kit、培养基添加剂等；
原代细胞相关技术服务和整体实验外包服务；
二、细胞株/系服务
细胞株/系培养、增殖、冻存和相关说明书；
细胞系培养过程的技术指导；
细胞系培养基、添加剂、血清及相关生长因子、试剂等；
三、iPS细胞
iPS细胞基础培养（有滋养层or无滋养层在）；
iPS细胞增殖及冷冻保存；
iPS基础培养技术实习；
新药及实验仪器上市前评估；
四、技术外包服务：各类细胞生物学实验、分子生物学实验、显微镜拍照服务等
五、其他：根据客户需要定制服务等
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