人胚肾细胞293T都有哪些应用？

　　人胚肾细胞293T来源于以腺病毒5DNA进行转化的肾细胞，适于滴定人腺病毒。细胞表达一种不寻常的由整联蛋白beta-1亚基和玻联蛋白alpha-v亚基组成的玻联蛋白细胞表面受体。Ad5插入片段进行了克隆和测序，结果表明碱基1-4344插入到了19号染色体(19q13.2)。293细胞比较容易转染，是一个很常用的表达研究外源基因的细胞株。293细胞的缺陷是生长过程中贴壁强度比较小。所以在实验过程中容易流失，从而影响实验结果。
 

　　人胚肾细胞293T用于纳米Fe3O4/Cr(Ⅵ)复合物对大肠杆菌及人胚肾细胞的毒性研究。以Cr(Ⅵ)为典型重金属污染物的代表，利用纳米四氧化三铁吸附水中Cr(Ⅵ)，选择大肠杆菌E.coli和人胚肾细胞HEK293两种不同层级的生物作为模型，研究磁性纳米四氧化三铁吸附Cr(Ⅵ)离子后的复合物对两种生物产生的毒性效应。本研究的浓度作用范围如下:MNPs浓度为250μg/mL，Cr(Ⅵ)浓度分别为1、2、3μg/mL，MNPs吸附不同浓度Cr(Ⅵ)后的MNPs/Cr(Ⅵ)复合物，作用时间为24h。
 

　　1、本研究采用共沉淀法，合成了纳米四氧化三铁颗粒(MNPs)，并利用MNPs吸附水中的Cr(Ⅵ)，制备了MNPs/Cr(Ⅵ)复合物。研究发现，MNPs能够有效的吸附水中的Cr(Ⅵ)离子;MNPs对Cr(Ⅵ)的吸附符合Langmuir模型。MNPs/Cr(Ⅵ)复合物呈球形，颗粒大小一致，分布均匀，单分散性好，性质比较稳定。
 

　　2、在本研究的浓度范围和作用时间下，Cr(Ⅵ)对大肠杆菌E.coli具有明显的毒性效应，并且与Cr(Ⅵ)浓度呈剂量相关性。在Cr(Ⅵ)离子的作用下，E.coli的生长受到明显的抑制，Cr(Ⅵ)能够引起E.coli内活性氧显著升高，并导致氧化损伤，使细胞结构严重受损。MNPs及MNPs/Cr(Ⅵ)复合物对E.coli没有显著的毒性效应。
 

　　与空白组比较，生长曲线没有出现明显的变化，在MNPs、MNPs/Cr(Ⅵ)复合物作用下，E.coli内活性氧略微升高，但并未导致明显的氧化损伤。通过透射电镜观察到仅有少量的MNPs、MNPs/Cr(Ⅵ)复合物吸附在大肠杆菌的表面，但细胞膜的通透性及细胞结构没有发生明显变化。MNPs/Cr(Ⅵ)复合物在LB培养基中都是带负电的颗粒，且水合粒径都在200nm左右，导致MNPs/Cr(Ⅵ)复合物没有进入到大肠杆菌细胞内，仅有少量的MNPs/Cr(Ⅵ)复合物吸附在大肠杆菌表面，尽管产生了少量的活性氧，但不足以导致细胞代谢失衡。因此，MNPs及MNPs/Cr(Ⅵ)复合物对E.coli没有产生明显的毒性效应。
 

　　3、在本研究的浓度范围和作用时间下，Cr(Ⅵ)对人胚肾细胞HEK293的毒性效应显著，并且与Cr(Ⅵ)浓度剂量相关。在Cr(Ⅵ)离子的作用下，细胞的形态和密度都发生了显著变化，细胞活力明显下降，同时引起细胞内活性氧显著升高，导致氧化损伤，并诱导了细胞的凋亡。在MNPs、MNPs/Cr(Ⅵ)复合物的作用下，与空白组相比，细胞的形态、密度和细胞活力均没有出现明显的变化。
 

　　MNPs吸附Cr(Ⅵ)后，显著降低了Cr(Ⅵ)对HEK293细胞诱导产生的破坏作用，MNPs/Cr(Ⅵ)复合物没有引发细胞的氧化损伤，证实了细胞膜和细胞结构没有受到明显的破坏。在DMEM培养基中，由于MNPs/Cr(Ⅵ)复合物的水合粒径基本都在200～400nm之间，且表面电荷都是带负电，导致绝大多数的复合物不能进入细胞内，MNPs/Cr(Ⅵ)复合物在HEK293细胞内的摄取量极小，这些颗粒是从细胞外通过质膜内陷形成囊泡进入细胞，但没有进入到细胞核中，在正常代谢途径下不会导致细胞的凋亡。因此，MNPs及MNPs/Cr(Ⅵ)复合物对HEK293细胞没有显著毒性效应。